Одной из наиболее распространенных процедур в косметологии на сегодняшний день является контурная пластика. Для эстетической коррекции различных зон применяются филлеры на основе гиалуроновой кислоты и гидроксиапатита кальция (ГАК). По имеющейся у нас информации, на рынке России представлено несколько десятков препаратов, и с каждым днем это число растет!
Значение данного факта неоднозначно, поскольку появление новых препаратов всегда имеет две «стороны». С одной стороны, это расширение арсенала врачей-косметологов и возможностей коррекции внешности, с другой — риск использования недостаточно изученных препаратов, имеющих низкий профиль безопасности.
Ранее нами было показано, что препараты разных торговых марок отличаются в плане поверхностного натяжения, демонстрируемого ими при нанесенна предметное стекло, дерму и жировую клетчатку человека. При этом поверхностное натяжение единственного сертифицированного филлера Radiesse, характеризующегося минимальным количеством нежелательных эффектов после его введения, оказалось существенно выше, чем у его аналогов, что может являться фактором минимальной фагоцитарной активности тканевых макрофагов и воспалительной реакции в целом при инъекционном введении препарата в ткани.
Известно, что поверхностное натяжение на поверхности частиц и активность их захвата макрофагами, помимо некоторых других факторов, зависят от размеров этих частиц и их конфигурации, в связи с чем можно предполагать, что различие поверхностного натяжения у разных филлеров может быть обусловлено различными размерами и формой частиц ГАК, составляющего основу этих препаратов.
Целью данной работы явилось сравнительное изучение некоторых геометрических и светооптических характеристик частиц ГАК в различных филлерах.
Материалы и методы
Объектами исследования послужили филлеры:
1) Radiesse (MERZ Aestetics, США);
2) Delice Hydroxy (Bazel Shtatget, Швейцария);
3) Crystalys (Panaxia LTD, Германия);
4) Facetem (CGBio, Южная Корея);
5) Renú (Cytophil, Inc., США).
Препараты для исследования изготавливали следующим образом. Каплюфиллера наносили на обезжиренное предметное стекло («Biovitrum», Россия), рядом помещали каплю воды и с помощью кисточки смешивали препарат с водой, чтобы обеспечить расположение на стекле составляющих его частиц в один слой с достаточным расстоянием друг от друга. Далее полученную взвесь тонким слоем распределяли по стеклу. После высыхания исследовали препарат в проходящем свете с помощью светового микроскопа JENAMED-2 (Германия), оснащенного приспособлением для поляризационной микроскопии.
Морфометрическое изучение препаратов проводили посредством соединенной с микроскопом системы интерактивного анализа изображения «Видеотест» (Россия). Количественные исследования выполняли слепым методом, для чего один из исследователей изготавливал препараты, условно маркировал их, а другой производил морфометрию, зная только номер, но не название препарата.
Результаты исследования
Анализ геометрических и светооптических свойств частиц в различных филлерах позволил установить следующее.
Radiesse
Частицы ГАК в препарате оказались почти одинаковой величины (коэффициент вариации 3,75), диаметром от 22,5 до 40 мкм (в среднем 30±4,95 мкм), шаровидной формы, в проходящем свете выглядели светлыми, имеющими оптически плотный ободок, что свидетельствует о более компактном расположении кристаллов ГАК в поверхностных отделах частиц. Среди основной массы частиц изредка встречались полностью темные, оптически плотные частицы, которые при исследовании в поляризованном свете демонстрировали более выраженную и более равномерную анизотропию. Среди частиц с четкой шаровидной формой встречались частицы с небольшими выступами. Количество таких частиц в среднем составляло 5,5%. Поверхность основной массы частиц выглядела мелкозернистой. На поверхности немногочисленных частиц, количество которых составило 4,7%, обнаруживались небольшие кратерообразные углубления, которые мы обозначили как каверны.
Delice Hydroxy
Частицы ГАК, как и в предыдущем наблюдении, имели в основной своей массе правильную шаровидную форму, выглядели светлыми, с оптически плотным ободком. Полностью темных, оптически плотных частиц в этом препарате не было, как и частиц с выступами. В отличие от предыдущего наблюдения довольно многочисленными оказались частицы неправильной округлой формы, количество которых составило 9,5%. Больший диаметр частиц (с учетом неправильной формы многих из них) был более вариабельным (коэффициент вариации 7,96) и колебался от 17,5 до 47,5 мкм, составляя в среднем 30,5±7,0 мкм. Особенностью препарата оказались многочисленные мелкие каверны на поверхности 33,3% частиц ГАК. Наряду с описанными частицами местами встречались мелкие шаровидные частицы диаметром 7,5–8,8 мкм.
Crystalys
Частицы ГАК в основной своей массе были шаровидной формы, светлыми, с оптически плотным ободком. Диаметр частиц колебался от 17,5 до 35,0 мкм,составляя в среднем 29,2±4,1 мкм, при коэффициенте вариации 2,7. Полностью темные, оптически плотные частицы были единичными в полях зрения. При исследовании в поляризованном свете эти частицы не демонстрировали каких-то особенностей анизотропии по сравнению с другими. Частиц с выступами практически не было, зато частицы с поверхностными дефектами составили 31,6%. Иногда эти дефекты имели вид кратеров, но большей частью — полосовидных щелей, идущих в одинаковом направлении или взаимно пересекающихся. Обращает на себя внимание наличие среди частиц осколков неправильной формы, при этом наибольший размер самых мелких осколков составил 5 мкм.
Facetem
В этом препарате частицы ГАК демонстрировали значительную вариабельность в отношении размеров (коэффициент вариации 6,8), имели шаровидную форму, были светлыми, с оптически плотным ободком. Средний диаметр составил 31,2±6,4 мкм (от 17,5 до 45 мкм). Встречались довольно многочисленные, полностью темные, оптически плотные частицы, которые при исследовании в поляризованном свете демонстрировали более выраженную и более равномерную анизотропию. Частиц с выступами практически не было, зато около 1/3 (32,5 на 100) составляли частицы с кратерами.
Renú
Как и в предыдущем наблюдении, частицы ГАК характеризовались значительной вариабельностью в отношении их диаметра (коэффициент вариации 7,6) и формы: только 31,7% частиц имели строго форму шара. По сравнению с другими исследованными препаратами в Renú частицы были в целом крупнее: диаметр их колебался от 25,0 до 52,5 мкм, составляя в среднем 38,5±6,9 мкм. Вероятно, в силу своего большего диаметра основная масса частиц выглядела темной, оптически плотный ободок не был выражен, четко прослеживался лишь у частиц неправильной формы. Полностью темные частицы были многочисленными и составляли в среднем 21,7%. Они демонстрировали достаточно равномерную анизотропию при исследовании в поляризованном свете в отличие от частиц неправильной формы, для которых оказалась характерной неравномерная анизотропия. Выростов на поверхности частиц практически не было, но кратерообразные дефекты имелись на поверхности 35% частиц.
Сводная светооптическая характеристика филлеров на основе ГАК представле-
на в приводимой ниже таблице.
Обсуждение
Из приведенной ниже таблицы видно, что сравниваемые препараты существенным образом отличаются друг от друга только по наличию выраженных дефектов на поверхности частиц ГАК. При этом в филлере Radiesse количество кратерообразных дефектов кардинально отличается в меньшую сторону(4,7% от всех частиц) от такового у филлеров Delice Hydroxy (33,3%), Facetem (32,5%) и Renú (35%). У филлера Crystalys кратерообразные дефекты немногочисленны, но зато на поверхности частиц имеется множество полосовидных дефектов.
Известно, что среди всех тел одинакового объема сфера имеет наименьшую площадь поверхности, следовательно, площадь поверхности любой частицы, отличной по конфигурации от шара, будет больше, чем у частиц круглой формы. Из курса физики также известно, что сила поверхностного натяжения — это сила, которая действует вдоль поверхности жидкости перпендикулярно линии, ограничивающей эту поверхность, и стремится сократить ее до минимума. В том случае, если размер длины границы твердой частицы и окружающей ее жидкости будет обозначен как l, а сила поверхностного натяжения пленки, которая действует на данной границе, — F, значение коэффициента поверхностного натяжения σ составит:σ = F/l
Следовательно, чем больше длина границы между поверхностью частицы и окружающей ее жидкости, тем ниже коэффициент поверхностного натяжения. Сила поверхностного натяжения является постоянной, обусловленной одинаковыми во всех случаях свойствами тканевой жидкости в тканях человека.
Исходя из этого, именно анизоморфность частиц ГАК (отклонение их формы от шаровидной за счет отмеченных нами кратерообразных и полосовидных дефектов) должна определять более низкое поверхностное натяжение на их поверхности. Вероятно, свой вклад в более низкое поверхностное натяжение, которое отличает дженерики от сертифицированного филлера Radiesse, как установлено нами в предыдущей работе, могут вносить наличие осколков частиц в препаратах Delice Hydroxy, Facetem и Renú и выраженная вариабельность конфигурации частиц ГАК у двух последних из упомянутых филлеров (см. таблицу).
Заключение
В предыдущем нашем исследовании, выяснено, что более низкое поверностное натяжение на поверхности частиц ГАК, которое должно способствовать активному их фагоцитозу макрофагами [1, 2, 5, 6] и возможному развитию нежелательных воспалительных реакций, характерно для препаратов Delice Hydroxy, Crystalys, Facetem и Renú.
Теперь можно считать установленным, что свойство, которое отличает эти препараты от сертифицированного филлера Radiesse, а именно, более низкое поверхностное натяжение, связано с нерегулярностью конфигурации входящих в их состав частиц ГАК.